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Title: Aislamiento, identificación y caracterización de metanotrofos a partir de agua estancada en el sector de Nanegal
Authors: Arisqueta Herranz, Lino
Vásconez Vaca, Juan Martín
Keywords: BIOTECNOLOGÍA
METANOL
HIDROCARBUROS
XILENO
TOLUENO
Issue Date: Apr-2023
Publisher: Universidad Internacional Sek
Citation: CT-BIO V985ai/2023
Abstract: Los metanotrofos y las bacterias oxidadoras de hidrocarburos son organismos únicos del filo Proteobacteria capaces de emplear metano e hidrocarburos de distintos ambientes como fuente de carbono y energía. Estas cumplen un rol importante en la recirculación global de carbono; (2) Se recolectaron muestras de agua suelo y heces de 3 puntos distintos (Nanegal, Pomasqui y Quito) las cuales fueron incubadas en medio AMS y NMS modificado con metanol como fuente de carbono hasta al obtención de aislados puros. Se caracterizó morfológicamente cada aislado mediante tinción Gram, así como su capacidad de usar citrato. Posteriormente, se extrajo DNA de cada aislado obtenido (9 en total) para su identificación por secuenciación Sanger y se determinó si estos pueden degradar y tolerar tanto xileno como tolueno; (3) Los aislados fueron identificados como Serratia liquefaciens, Rhanella, aqualitis, E. coli (cepas D6, AAK y NF36) y Acinetobacter iwoffi S14 con identidades mayores al 99% y coberturas mayores al 96%. Se detectaron 2 cepas problema que requieren identificación posterior (Sinployea atiensis y Paludibacterium denitrificans). Las cepas respondieron a la tinción como Gram (-), de los cuales R. aqualitis, E.coli NF36, A. iwoffii como la cepas problema mostraron crecimiento en presencia de xileno o tolueno ; (4) Se aislaron bacterias oxidadoras de hidrocarburos, indicando que el uso de metanol como sustituto de metano no permitió el aislamiento de metanotrofos, pero permitió aislar bacterias oxidadoras de hidrocarburos tanto de suelo como heces y agua.
Description: Methanotrophs and hydrocarbon oxidizing bacteria are unique organisms of the phylum Proteobacteria capable of employing methane and hydrocarbons from different environments as a source of carbon and energy. These play an important role in global carbon recirculation; (2) Soil, water and feces samples were collected from 3 different points (Nanegal, Pomasqui and Quito) which were incubated in methanol-modified AMS and NMS medium as a carbon source until pure isolates were obtained. Each isolate was morphologically characterized by Gram staining, as well as its ability to use citrate. Subsequently, DNA was extracted from each isolate obtained (9 in total) for identification by Sanger sequencing. The ability of each isolate to degradate and tolerate both xylene and toluene was tested. (3) The isolates were identified as Serratia liquefaciens, Rhanella, aqualitis, E. coli (strains D6, AAK and NF36) and Acinetobacter iwoffi S14 with identities greater than 99% and coverages greater than 96%. 2 problem strains that need further identification were detected (Sinployea atiensis and Paludibacterium denitrificans). The strains responded to the staining as Gram (-), of which R. aqualitis, E.coli NF36 and A. iwoffii showed growth in the presence of xylene or toluene ; (4) Hydrocarbon oxidizing bacteria were isolated, indicating that the use of methanol as a methane substitute did not allow the isolation of methaotrophos, but allowed the isolation of hydrocarbon oxidizing bacteria from soil, feces and water
URI: http://repositorio.uisek.edu.ec/handle/123456789/4995
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