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Title: Exosomas celulares con potencial de cicatrización y desarrollo de angiogénesis
Authors: Torres Arias, Marbel
Toscano Recalde, Fernanda Dessire
Keywords: BIOMEDICINA
QUERATINOCITOS HACAT
MIGRACIÓN CELULAR
PROLIFERACIÓN CELULAR
APOPTOSIS
Issue Date: Apr-2024
Publisher: Universidad Internacional Sek
Citation: CT-CBIO T713ex/2024
Abstract: Los exosomas son vesículas extracelulares de 30-150 nm de diámetro que actúan como mensajeros intercelulares, transportando una diversidad de biomoléculas que modulan la actividad de células clave en la reparación de tejidos, convirtiéndose en una herramienta terapéutica prometedora para el tratamiento de heridas crónicas y otras afecciones cutáneas. En este contexto, se propone el estudio de exosomas derivados de la línea celular HaCaT (queratinocitos humanos) con el fin de evaluar su posible efecto en la cicatrización de heridas. En este estudio se obtuvieron exosomas provenientes de queratinocitos que luego se cuantificaron mediante el Ensayo de Bradford, obteniéndose concentraciones proteicas en promedio de 929,60 µg/uL. El espectro UV-VIS evidenció un pico predominante a 280 nm correspondiente a proteínas, y otro a 260 nm correspondiente con ácidos nucleicos. Posteriormente, se evaluó la viabilidad celular en las líneas celulares HaCaT y HFF mediante el ensayo MTT, que indicó que los exosomas ejercen un efecto dependiente del tiempo en las células HaCaT. Asimismo, el ensayo de Scratch demostró que los exosomas reducen el área del raspado celular, promoviendo la migración celular. Por otra parte, la citometría de flujo determinó que los exosomas no alteran la tasa de apoptosis. En conclusión, los exosomas derivados de células HaCaT estimulan la proliferación y la migración celular, a la vez que preservan la tasa de apoptosis de la línea celular HaCaT, mientras que mantienen las tasas de proliferación y migración de células HFF. Esta combinación, junto con la falta de efectos adversos en queratinocitos y fibroblastos, los posiciona como candidatos prometedores para la administración de fármacos, la inmunoterapia y la terapia de precisión para el tratamiento de heridas que requieren reparación tisular.
Description: Exosomes are extracellular vesicles with a diameter of 30-150 nm that act as intercellular messengers, transporting a variety of biomolecules that modulate the activity of key cells in tissue repair, becoming a promising therapeutic tool for the treatment of chronic wounds and other skin conditions. In this context, the study of exosomes derived from the HaCaT cell line (human keratinocytes) is proposed to evaluate their potential effect on wound healing. In this study, exosomes were obtained from keratinocytes and then quantified using the Bradford Assay, resulting in average protein concentrations of 929.60 µg/uL. The UV-VIS spectrum showed a predominant peak at 280 nm corresponding to proteins, and another at 260 nm corresponding to nucleic acids. Subsequently, cell viability was evaluated in HaCaT and HFF cell lines using the MTT assay, which indicated that exosomes exert a time- and dose-dependent effect on HaCaT cells. Additionally, the Scratch assay demonstrated that exosomes reduce the area of cell scraping, promoting cell migration. Furthermore, flow cytometry determined that exosomes do not alter the apoptosis rate. In conclusion, exosomes derived from HaCaT cells stimulate cell proliferation and migration, while preserving the apoptosis rate of the HaCaT cell line, and maintaining proliferation and migration rates of HFF cells. This combination, along with the lack of adverse effects on keratinocytes and fibroblasts, positions them as promising candidates for drug delivery, immunotherapy, and precision therapy for wounds requiring tissue repair.
URI: http://repositorio.uisek.edu.ec/handle/123456789/5260
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